ELISA試劑盒的準(zhǔn)確性

ELISA方法的準(zhǔn)確性一般會(huì)用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗(yàn)證，因?yàn)槲业姆椒ㄉ婕暗叫》肿铀幬锏难苌鷾y(cè)定，所以液相的方法達(dá)不到回收率，請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有其他的方法可以用來(lái)驗(yàn)證ELISA方法的準(zhǔn)確性呢？有沒(méi)有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動(dòng)相沖突，不適合用液相去測(cè)定？

通常用ELISA方法檢驗(yàn)出來(lái)的陽(yáng)性樣品，需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證，因?yàn)?strong>ELISA方法的存在約5%左右的假陽(yáng)性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準(zhǔn)確性，是要根據(jù)被測(cè)組分的理化性質(zhì)決定的，例如組分在300度也不能夠汽化，肯定不能用GC-MS；組分結(jié)構(gòu)中有共軛，存在 n→π躍遷,π→π躍遷，一般會(huì)用HPLC紫外檢測(cè)器；若組分具有熒光或者通過(guò)衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì)，則會(huì)用HPLC熒光檢測(cè)器。以此類推，究竟用什么方法確證取決于被測(cè)組分的理化性質(zhì)，而不是憑空想象。

一是試劑本身的質(zhì)量評(píng)價(jià)，符合一定要求后才能生產(chǎn)供應(yīng)；二是在臨床應(yīng)用中效果的評(píng)價(jià)。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過(guò)中國(guó)藥品生物制品檢定，以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說(shuō)明書(shū)等外，對(duì)試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定，通過(guò)對(duì)一系列參比品的檢測(cè)，結(jié)果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)是用該試劑對(duì)臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)，以觀察其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。部臨檢中心對(duì)乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作，通過(guò)質(zhì)量評(píng)價(jià)，促進(jìn)了試劑質(zhì)量的提高。